Sistema fluidico FACS

Il sistema fluidico FACS sfrutta la pressione per trasportare le cellule del campione nella camera di flusso, dove vengono interrogate dal raggio laser. Puoi trovare una panoramica schematica di questo processo nella Figura 1.

Il sistema fluidico è composto da:

• Fluido di rivestimento o liquido di sheath: il liquido che scorre attraverso il sistema. Può trattarsi di buffer di flusso che trasporta il campione, o di etanolo che viene utilizzato nella procedura di pulizia e spegnimento.

• Serbatoi: i serbatoi principali sono quelli destinati a conservare il tampone di flusso e l'etanolo (utilizzato nella procedura di pulizia, non raffigurata nell'immagine), ma anche a raccogliere le cellule non selezionate come rifiuti.

• Tubazione: utilizzata per collegare l'intero sistema, a partire dal serbatoio con il tampone di flusso fino al serbatoio di scarico.

• Valvole e regolatori di pressione: la pressione è un parametro molto importante nel sistema fluidico, in quanto permette sia al tampone di flusso che al campione di attraversarlo e creare un flusso costante nella camera di flusso. Per fare ciò, la pressione del campione è solitamente più alta di quella del tampone di flusso. Le variazioni di entrambe le pressioni controllano la portata del campione, che è la quantità di campione che passa attraverso il punto di interrogazione.

• Camera di flusso: qui, il campione viene miscelato con il tampone di flusso per creare il flusso costante che poi passa attraverso il punto di interrogazione.

• Ugello: è posizionato subito dopo la camera di flusso, e poiché determina quanto è "denso" il flusso, sono disponibili ugelli di diverse dimensioni a seconda delle dimensioni delle cellule da selezionare. La dimensione dell'ugello dovrebbe essere circa quattro o cinque volte quella delle cellule che vengono smistate. La dimensione più comunemente usata per i batteri è l'ugello da 70 µm. Inoltre, esiste un ugello speciale, chiamato ugello a circuito chiuso.

Figura 1: Sistema fluidico FACS.