Preparazione della fermentazione

Inoculo

Per avviare una fermentazione è necessaria una precoltura contenente una determinata quantità di cellule sane da usare come inoculo. La coltura utilizzata come inoculo per la fermentazione deve soddisfare i seguenti requisiti:

• In buona salute e con microrganismi attivi, così da ridurre al minimo la durata della fase di latenza

• Priva di contaminazioni

• Con una morfologia adatta

• Disponibile in volume sufficiente

• Con capacità inalterata di formare i suoi prodotti specifici

Evitare le contaminazioni

Una delle cose peggiori che possano accadere durante gli esperimenti di fermentazione è il rilevamento della presenza di contaminanti. I contaminanti sono microrganismi indesiderati in competizione per i nutrienti con il ceppo originale, e che compromettono l'esperimento. I contaminanti possono essere rilevati al microscopio o dal set di dati. Un contaminante spesso cresce rapidamente, generando livelli di CO₂ molto elevati e una grande concentrazione di biomassa rispetto al prodotto. È di cruciale importanza prevenire le contaminazioni; pertanto, il bioreattore deve essere sterilizzato prima di iniziare la fermentazione.

I fermentatori o bioreattori possono essere sterilizzati con o senza il terreno di coltura. Di solito i bioreattori vengono sterilizzati attraverso il riscaldamento della guaina esterna o della serpentina, utilizzando il vapore all'interno del recipiente. Per una corretta sterilizzazione, la pressione del vapore all'interno del reattore deve essere di 1,03 bar per 20 minuti. Al termine della sterilizzazione è importante mantenere una pressione positiva all'interno del reattore; in caso contrario, potrebbe svilupparsi un vuoto in grado di risucchiare aria non sterile al suo interno.