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Analisi dell'elettroforesi su gel

Dopo l'elettroforesi, i diversi frammenti sono visualizzati come bande a distanze specifiche dalla parte superiore del gel (l'estremità negativa dell'elettrodo) in base alle loro dimensioni. Le dimensioni dei campioni di acido nucleico possono essere stimate confrontando la distanza con i campioni di peso molecolare standard (chiamati anche scala di DNA).

Ogni frammento sarà una banda nel gel. Una miscela di frammenti di varie dimensioni appare come una lunga striscia. Se i frammenti sono troppo grandi, come nel caso del DNA genomico non tagliato, formeranno una singola grande banda nella parte superiore del gel.

I risultati dell'elettroforesi su gel sono presentati come bande rosa sparse in tutto il gel. La prima colonna a destra con 6 bande che si estendono dall'alto verso il basso del gel è contrassegnata come marker, noto anche come scala di DNA. Il resto delle colonne, con poche bande in ogni colonna, rappresentano i campioni. Le bande rosa sono contrassegnate come frammenti di DNA separati e la loro posizione nel gel può essere confrontata con la scala del DNA per determinare la loro dimensione.

Figura 1: un esperimento di elettroforesi su gel completato con 5 campioni e la scala di DNA sulla destra. La scala di DNA può essere utilizzata per stimare le dimensioni delle bande nei campioni.

I plasmidi circolari si muovono a velocità diverse a seconda della loro conformazione (intaccata, lineare, legata in modo covalente, superavvolta e circolare a singolo filamento). Un plasmide superavvolto viaggia più velocemente perché ha meno attrito contro la matrice di agarosio rispetto al plasmide intaccato o lineare.

Se vuoi isolare un frammento specifico puoi tagliare il gel ed estrarre il DNA.