Dosaggio del glucosio

Esistono tre approcci principali per la misurazione della concentrazione di glucosio: il metodo di riduzione, il metodo di condensazione e il metodo enzimatico.

Oggi useremo il metodo enzimatico. Il reagente per il dosaggio del glucosio contiene glucosio ossidasi, perossidasi e o-dianisidina. L'ossidasi reagisce con il glucosio generando acido gluconico e perossido di idrogeno.

La perossidasi reagisce con il perossido di idrogeno, prodotto quando il glucosio è ossidato, e con la o-dianisidina incolore ridotta, per produrre un prodotto di colore marrone (o-dianisidina ossidata).

Poiché questo prodotto è instabile, per fermare la reazione si aggiunge acido solforico denaturando tutti gli enzimi e si forma un prodotto di colore rosa (o-dianisidina ossidata protonata), che è stabile e assorbe la luce a 540 nm. Per ogni molecola di glucosio nella soluzione viene prodotta una molecola di questo prodotto colorato.

Figura 1: Reazioni del dosaggio del glucosio