Colonna
La colonna è una parte fondamentale del sistema HPLC poiché è qui che avviene la separazione degli analiti. La colonna è riempita con piccole sfere di silice che possono essere rivestite. È il materiale di rivestimento che le ricopre a determinarne la polarità. Le sfere di silice sono polari per natura ma, quando sono ricoperte da lunghe catene di carbonio, diventano non polari. Poiché le sfere all'interno della colonna sono ferme durante il procedimento, si parla di fase stazionaria.
Nella fase inversa, la fase stazionaria all'interno della colonna è non polare. Pertanto, gli analiti non polari interagiranno con la colonna e vi rimarranno più a lungo, lasciando la colonna in tempi successivi rispetto ai composti polari.
Figura 1. Questa immagine illustra delle sfere densamente impacchettate all'interno di una colonna, come mostrato dal primo ingresso circolare. Quando ingrandiamo le singole sfere, come mostrato dal secondo ingresso circolare, è possibile vedere il materiale che ne riveste la superficie.
Figura 2. Scala di polarità della fase stazionaria.