Trascrizione PCR quantitativa e inversa

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo che permette di generare copie di specifiche sequenze di DNA in laboratorio. Simile alla replicazione del DNA della cellula, il DNA a doppio filamento viene separato e ogni filamento serve come modello per un filamento complementare. In ogni ciclo di replicazione, la quantità di DNA raddoppia. A differenza della replicazione del DNA nella cellula, il processo di replicazione parte dal legame di una breve sequenza complementare chiamata primer con il DNA bersaglio.

La PCR quantitativa (qPCR) è una variante della PCR nella quale la quantità iniziale di DNA nel campione viene determinata misurando il tasso di replicazione. Attraverso l'uso di sonde fluorescenti o coloranti che diventano fluorescenti solo quando sono legati al DNA a doppio filamento, la replicazione può essere rilevata in tempo reale. Utilizzando primer specifici per un certo patogeno, la formazione del DNA e quindi la fluorescenza è indicativa della presenza del DNA di questo patogeno.