Clonazione molecolare

La clonazione molecolare si riferisce all'assemblaggio di molecole di DNA in un vettore e la conseguente trasformazione di un organismo (spesso lieviti o batteri). I metodi di clonazione molecolare sono fondamentali nella medicina e nella biologia. Il termine "clonazione molecolare" comprende molte tecniche diverse. Un processo tipico di clonazione molecolare include i seguenti passaggi:

1. Isolamento del gene di interesse

2. Clonazione del gene in un vettore

3. Trasformazione dell'organismo ospite con il vettore

4. Selezione antibiotica delle cellule trasformate

5. Isolamento dei cloni con lo stesso patrimonio genetico

La conferma dell'assemblaggio del plasmide può avvenire effettuando il sequenziamento del DNA. È importante confermare che gli inserti siano stati correttamente legati a un vettore plasmidico, con la corretta struttura di conformazione e lettura. Variazioni nella struttura possono causare mutazioni nonsenso e missenso che comportano l'espressione di proteine non funzionali.

• Tecniche di clonazione