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Cromatogramma

I cromatogrammi rappresentano la forza del segnale acquisito dal rivelatore HPLC rispetto al tempo. Prima che il composto raggiunga il rivelatore, c'è un segnale di rumore di fondo chiamato linea di base. Quando il composto raggiunge il rilevatore, questo segnale inizia ad aumentare fino a un massimo e poi decresce fino a rilevare tutto il composto. Questo massimo corrisponde all'altezza del picco. Il tempo dall'iniezione fino a questo picco massimo è il tempo di ritenzione (tR).

Dalla linea di base, la curva contiene un'area definita al di sotto di essa. Questa area di picco viene utilizzata per effettuare una calibrazione basata sul fatto che essa è proporzionale alla concentrazione del composto. Maggiore è la concentrazione, maggiore è l'area del picco e maggiore è l'altezza del picco.

Grafico con la risposta del rivelatore indicata sull'asse y e il tempo indicato sull'asse x. La linea di base dell'iniezione del campione è una linea piatta appena sopra lo zero. Una linea rossa curva verso l'alto a partire dalla linea di base in un punto temporale di esempio e raggiunge un picco, quindi curva in basso verso la linea di base. C'è una freccia dalla linea di base alla parte superiore del picco indicata come altezza del picco. Un'altra freccia dalla linea di base alla metà dell'altezza del picco è indicata come altezza divisa per 2. Il tempo di ritenzione è il tempo dal punto di iniezione al tempo dell'altezza del picco.

Figura 1. Esempio di cromatogramma.

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Articolo
Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC)