Purezza degli acidi nucleici

La purezza degli acidi nucleici può essere determinata misurando l'assorbanza a diverse lunghezze d'onda.

Gli acidi nucleici assorbono fortemente la luce a 260 nm, le proteine assorbono fortemente a 280 nm, mentre i contaminanti chimici (come i composti organici fenolo e trizolo) assorbono la luce a 230 nm. Inoltre, l'assorbanza a 320 nm può anche essere misurata per controllare qualsiasi altra contaminazione particellare. Pertanto, è possibile valutare facilmente la purezza dell'acido nucleico calcolando il rapporto tra 260/280 nm, 260/230 nm e 260/320 nm.

Ogni rapporto ha un valore specifico che determina la purezza del campione:
- Per 260/280, un rapporto di circa 1,8 è comunemente accettato come DNA puro. Per l'RNA, il rapporto dovrebbe essere più alto, intorno a 2.
- Per 260/230, un rapporto maggiore di 1,8 è accettato come un campione di acido nucleico puro.
- Per 260/320, un rapporto di 1,8-2,2 significa generalmente che il campione di acido nucleico è accettato come puro.

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