Diluzione seriale
Le diluizioni seriali sono utili se si vuole ottenere una soluzione molto diluita di una soluzione madre molto concentrata. Ad esempio, se si vogliono ottenere 10 mL di soluzione 1 mM da una soluzione madre 1 M, è possibile procedere nei seguenti modi.
1) Tramite diluizione diretta:
M1V1 = M2V2
V1 = M2V2/ M1
= (10 mL · 1 / 1000 M) / 1 M
= 0,01 mL
Acqua da aggiungere: 10 mL - 0,01 mL = 9,99 mL
In questi casi, la diluizione diretta non è molto utile perché sarebbe difficile prelevare con una pipetta il quantitativo esatto di 9,99 mL.
2) Tramite diluizione seriale
Se invece si utilizza la diluizione seriale, prima si stabiliscono il volume finale e le concentrazioni necessarie, poi si determina il fattore di diluizione.
Quindi, se abbiamo bisogno di 10 mL di una soluzione 1 mM, il nostro fattore di diluizione è:
Fattore di diluizione = 1 / (concentrazione finale / concentrazione iniziale) = 1 / (0,001 M / 1 M) = 1000X
È possibile scomporre 1000X in fattori, ovvero 10x10x10. Ciò significa che possiamo predisporre 3 provette per effettuare la diluizione seriale. Una diluizione 10X significa che una parte è costituita dalla soluzione e le 9 parti rimanenti dal diluente (che di solito è acqua). Allo stesso modo, per una diluizione 15X useremo 1 parte di soluzione e 14 parti di diluente.
Figura 1: diluizione seriale. 1 mL di soluzione madre viene trasferito nella seconda provetta che contiene 9 mL di diluente (ad esempio acqua). Poi 1 mL (aliquota) viene prelevato dalla seconda provetta e trasferito nella terza provetta. Il processo di trasferimento dell'aliquota viene ripetuto fino a raggiungere la concentrazione di diluizione desiderata.
Anche se la diluizione seriale richiede una maggiore preparazione, garantisce diluizioni più accurate, a condizione che la tecnica sia eseguita con precisione.