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Procedura della TLC

La procedura di esecuzione di un esperimento TLC è descritta nel dettaglio qui di seguito:

All'interno della camera di sviluppo TLC, c'è una piastra TLC e un becher coperto con una carta da filtro circolare nella parte posteriore. La piastra TLC ha una linea tracciata a circa 1,5 cm dal fondo e un punto campione nero al centro di questa linea. Nel becher è presente una piccola quantità di solvente, appena sotto il punto del campione.

Fig 1: Schema della camera di sviluppo.

  1. Dopo aver scelto il tuo sistema solvente, versane circa un cm nel becher.

  2. Applica una carta da filtro al becher nella parte inferiore dove la carta da filtro si trova immersa nel solvente e raggiunge la parte superiore del becher.

  3. Copri il becher con un coperchio o una lastra di vetro trasparente. In questo modo ti assicuri che il solvente non evapori.

  4. Partendo dal basso della della piastra TLC disegna con una matita una linea retta all'altezza di 1,5 cm. Aggiungi un segno e un'etichetta sotto la linea di base della piastra in cui ciascun campione verrà individuato, assicurandoti di non toccare la piastra di silice e di non esercitare troppa pressione con la matita.

  5. Utilizzando un tubo capillare, deposita una piccola quantità di campione in un'area concentrata sulla piastra nel punto con il segno corretto. Lascia che il punto si asciughi e ripeti ancora 2-3 volte per assicurarti che sia presente una quantità sufficiente del campione. Ripeti questa procedura per ciascun campione.

  6. Aiutandoti con una pinzetta o un forcipe colloca con attenzione la piastra TLC nella camera di sviluppo, facendo attenzione che la linea di base non sia immersa nel solvente. Se ciò avviene significa che hai aggiunto troppo solvente.

  7. Copri la camera TLC in modo tale da consentire alla fase mobile di essere attirata sulla piastra TLC per effetto della capillarità.

  8. Rimuovi la piastra TLC dalla camera, quando il solvente è approssimativamente a 1 cm dalla parte superiore della piastra; in tal modo si consentirà alla piastra TLC di asciugarsi prima di procedere con l'analisi.