Metodi di trasfezione

Esistono diversi modi per introdurre acidi nucleici nelle cellule dei mammiferi, ma non c'è una metodologia che funzioni per tutti i tipi di cellule. Negli ultimi anni sono stati quindi sviluppati numerosi metodi e reagenti per facilitare la trasfezione di un'ampia varietà di linee cellulari. Questi metodi possono essere classificati in tre gruppi principali:

• Metodi chimici. Tutti questi metodi si basano sullo stesso principio: l'aggiunta di molecole cariche positivamente che formano dei complessi con l'acido nucleico, permettendone l'interazione con la membrana cellulare e il successivo ingresso all'interno della cellula. I tre principali metodi chimici sono riassunti nella Figura 1.

Figura 1. Metodi di trasfezione chimica. A. trasfezione a base di lipidi; B. trasfezione con fosfato di calcio; C. trasfezione mediante polimeri cationici.

• Metodi fisici. Questi metodi sfruttano diversi strumenti fisici per l'inserimento degli acidi nucleici; il più comune è l'elettroporazione.

• Metodi biologici. Sono metodi comunemente usati nella ricerca clinica e si basano sull'impiego di virus. La trasfezione mediata da virus è nota anche col nome di trasduzione.