Vmax

In conformità all'equazione di Michaelis-Menten, la velocità di reazione iniziale (V₀) aumenta all'aumentare delle concentrazioni di substrato [S]. La velocità di reazione aumenta di più con concentrazioni di substrato più basse, e alla fine raggiunge un plateau, avvicinandosi alla velocità massima V_max (Fig. 1). La massima velocità iniziale viene raggiunta quando l'enzima è saturo, cioè quando è presente abbastanza substrato da assicurare che praticamente tutto l'enzima faccia parte del complesso enzima-substrato. Poiché l'enzima non può mai essere completamente saturo, V_max non viene mai raggiunto completamente. V_max dipende da 2 cose: il numero di turnover dell'enzima (k_cat), e la concentrazione dell'enzima [E] [1].

Vmax = [E] • kcat

Così, una [E] più alta porta a una V_max più alta. Il numero di turnover sarà descritto più dettagliatamente nella pagina seguente.

Figura 1: un'illustrazione dell'equazione di Lineweaver-Burk adattata a una doppia trasformazione reciproca di un set di dati cinetici enzimatici.

Determinare V_max

Proprio come k_m, V_max può essere determinato usando l'equazione di Lineweaver-Burk (Figura 1):

1/V₀ = 1/V_max + K_m/V_max • 1/[S]

Sulla base di questa equazione, una linea retta adattata a un grafico reciproco doppio avrà l'intercetta y 1/V_max, e V_max può quindi essere ottenuto prendendo il reciproco di questa intercetta [1].

Fonti

1. Lehninger, Albert L.; Nelson, David L.; Cox, Michael M. (2008). Principles of Biochemistry (5th ed.). New York, NY: W.H. Freeman and Company. ISBN 978-0-7167-7108-1.

K_m

k_cat

Panoramica della teoria