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Voltage clamp

Il metodo del voltage clamp è usato in elettrofisiologia per registrare la corrente ionica attraverso le membrane di cellule eccitabili, come i neuroni, mantenendo una tensione di membrana fissa. Al contrario del metodo del current clamp, il metodo del voltage clamp controlla il potenziale di membrana.

Come funziona il metodo del voltage clamp?

Un voltage clamp basico misura iterativamente il potenziale di membrana usando due elettrodi, e poi cambia il potenziale di membrana (tensione) al valore fisso desiderato aggiungendo l'esatta quantità necessaria di corrente attraverso l'iniezione di ioni. Questo "blocca" la membrana cellulare a una tensione costante desiderata mentre registra anche quali correnti vengono erogate per raggiungere la tensione costante. Poiché le correnti applicate alla cellula devono essere uguali (e di carica opposta) alla corrente che attraversa la membrana cellulare alla tensione impostata, le correnti registrate indicano come la cellula, o un canale ionico specifico, reagisce ai cambiamenti del potenziale di membrana. È importante utilizzare il tampone appropriato quando si studiano canali ionici specifici utilizzando la tecnica del patch clamp.

Ci sono 2 grafici. Nel primo grafico, la tensione in millivolt è sull'asse y, e il tempo in millisecondi è sull'asse x. A 0 millisecondi la tensione è meno 70 millivolt. A 1 millisecondo la tensione sale a meno 5 millivolt. La tensione rimane a meno 5 millivolt per i successivi 4 millisecondi. Nel secondo grafico, la corrente in nanoampere è sull'asse y, e il tempo in millisecondi è sull'asse x. A 0 millisecondi la corrente è 0 nanoampere. A 1 millisecondo la corrente diminuisce a meno 3 nanoampere. Poi la corrente aumenta a 0 nanoampere tra 1 e 3 millisecondi. Questo aumento è inizialmente ripido tra 1 e 2 millisecondi, prima di diventare un aumento più graduale dopo 2 millisecondi, ad esempio un esponenziale. La corrente rimane a 0 nanoampere per i successivi 2 millisecondi.

Figura 1: Esempio di registrazione della corrente con il metodo del voltage clamp