Lavaggio

La fase di lavaggio nel metodo ELISA consiste nel lavare via eventuali antigeni, anticorpi e altre molecole non legate che potrebbero interferire con i risultati. Quindi un lavaggio adeguato è importante e l'utilizzo di un tampone appropriato garantirà anche risultati accurati. Un lavaggio improprio può portare a falsi positivi o falsi negativi.

Un lavaggio insufficiente produrrà un rumore di fondo elevato, mentre un lavaggio eccessivo potrebbe comportare una diminuzione della sensibilità causata dall'eluizione dell'anticorpo e/o dell'antigene dal pozzetto. Il lavaggio viene eseguito in un tampone fisiologico come la soluzione salina tamponata con Tris (TBS) o la soluzione salina tamponata con fosfato (PBS). Al tampone può anche essere aggiunto un detergente come Tween-20 allo 0,05% per aiutare a rimuovere i leganti non specifici. Un elevato rapporto segnale:rumore consente un facile rilevamento.