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Il Western blot

Il Western blot è una tecnica usata per identificare le proteine. Con questo metodo si può individuare una specifica proteina in una soluzione che ne contiene diverse. Il termine Western blot si riferisce in particolare al trasferimento di proteine e alla loro individuazione usando degli anticorpi specifici.

Il flusso sperimentale inizia sul lato sinistro dell'immagine. Sotto la lettera A c'è  una fiala con molte piccole molecole di tre colori diversi. Una freccia punta dalla fiala alla membrana rettangolare blu allineata verticalmente sotto la lettera B. Sulla superficie della membrana, tre molecole colorate sono separate in tre gruppi: un gruppo in cima alla membrana, uno al centro e uno in basso. Una freccia spessa punta dalla membrana blu a un'altra immagine di un rettangolo blu con dietro un rettangolo giallo più sottile, anch'esso allineato verticalmente, sotto la lettera C. Delle frecce sottili passano attraverso la membrana blu sulla membrana gialla, indicando il passaggio delle molecole colorate. Un'altra freccia punta a destra verso una nuova immagine della membrana rettangolare gialla, sotto la lettera D, con quattro strutture a forma di antigeni nell'angolo superiore sinistro della membrana. Infine, un'ultima freccia punta verso una membrana rettangolare grigia, sotto la lettera E, con una banda nera nel suo angolo superiore sinistro

Figura 1. Fasi del Western blot.

Dopo la preparazione del campione (A), questo viene caricato su un gel di poliacrilammide SDS (B) e le proteine che lo compongono vengono separate tramite elettroforesi su gel. Nella fase successiva, le proteine separate vengono trasferite su una membrana (C) e individuate da anticorpi che colpiscono la proteina di interesse (D). Infine, le bande con la proteina individuata vengono visualizzate sulla membrana (E).