La procédure de CCM

La procédure pour effectuer une expérience de CCM est décrite en détail ci-dessous :

Figure 1 : configuration de la cuve à chromatographie.

1. Après avoir déterminé votre mélange de solvants, ajoutez environ 1 cm de solvant dans une cuve CCM.

2. Ajoutez un papier filtre dans la cuve - le bas du papier filtre est immergé dans le solvant et atteint le haut de la cuve.

3. Couvrez la cuve avec un couvercle ou un verre de montre. Cela permet d'éviter que le solvant volatil ne s'évapore de la cuve.

4. Marquez au crayon une ligne droite à 1,5 cm du bas de la plaque de CCM. Ajoutez une marque et un libellé sous la ligne de dépôt à l'endroit où chaque échantillon sera déposé sur la plaque - en veillant à ne pas toucher la surface de la plaque de silice ni à appuyer trop fort avec le crayon.

5. À l'aide d'un tube capillaire, déposez une petite quantité de l'échantillon dans une zone concentrée sur la plaque de CCM au niveau du marquage correspondant. Laissez la tache sécher et recommencez 2 à 3 fois pour vous assurer qu'une quantité suffisante d'échantillon est présente. Répétez ce processus pour chaque échantillon.

6. Placez la plaque de CCM avec précaution dans la cuve à chromatographie à l'aide d'une pince en vous assurant que la ligne de dépôt n'est pas immergée dans le solvant. Si c'est le cas, vous avez ajouté trop de solvant.

7. Couvrez la cuve à chromatographie et laissez la phase mobile migrer vers le haut de la plaque de CCM par action capillaire.

8. Retirez la plaque de CCM de la cuve lorsque le front du solvant est à environ 1 cm du haut de la plaque de CCM. Laissez la plaque de CCM sécher avant de procéder à l'analyse.