Preparación de la electroforesis en gel
Para realizar un experimento de electroforesis en gel necesitarás las siguientes herramientas:
- Matriz de gel semisólido poroso
- Muestra de ADN o ARN
- Solución tampón de carga
- Tinte
- Muestras estándar de peso molecular o «marcadores»
Matriz de gel semisólido poroso. Suele ser un gel de agarosa o de poliacrilamida. En este laboratorio virtual, este gel ya viene preparado en el interior de la máquina de electroforesis en gel.
Muestra de ADN o ARN. ADN o ARN aislado y tratado en cantidad suficiente como para que sea visible en un experimento de electroforesis en gel.
Solución tampón de carga. La solución tampón de carga contiene un reactivo de color que ayuda a visualizar cuánto han viajado el ADN o el ARN durante la electroforesis en gel. La solución tampón de carga también hace la muestra más pesada, de forma que se hunde hasta la parte inferior del gel.
Suele contener las siguientes sustancias químicas:
- Reactivo colorante, como xileno cianol, rojo de cresol, azul bromofenol o naranja G
- Reactivo de alta viscosidad, como ficol, sacarosa o glicerol, para hacer la muestra más viscosa y pesada
- Agua para diluir los reactivos mencionados
Tinte. Durante la preparación, se añaden a la mezcla del gel tintes fluorescentes o de colores que se unen a los ácidos nucleicos. Otra opción es empapar el gel en una solución de tinción tras completar la electroforesis.
Muestras estándar de peso molecular. Se trabaja con ellas a la vez que con la muestra de ADN o ARN para proporcionar un tamaño de referencia. Se conocen también como «marcadores de peso molecular».